TIRF、共聚焦、FRET、光活化和顯微注射技術(shù)幫助科學(xué)家們克服了許多活細胞成像中的困難。所有技術(shù)的核心就是Ti,擁有這款強有力的新型倒置顯微鏡,您可以在尼康光學(xué)系統的幫助下輕松使用上述技術(shù)。Ti系列共有三種型號,改進(jìn)的系統速度,提升的靈活性和多模式特點(diǎn)使Ti成為用于研究和活細胞成像的理想系統。
高質(zhì)量相差圖像
尼康世界ling先的光學(xué)設計者開(kāi)發(fā)了*的外部相差單元。使用這一革新系統,將相差環(huán)整合至顯微鏡主體而不是物鏡里,使用者不必使用相差專(zhuān)用物鏡來(lái)觀(guān)察相差圖像,并可以通過(guò)高數值孔徑物鏡來(lái)得到高質(zhì)量圖像。另外使用不帶相差環(huán)的物鏡可以得到"全亮度"的熒光圖像。
置于顯微鏡主體內的相差環(huán)
將原本置于相差物鏡中的相差環(huán)置于顯微鏡的主體的外部相差單元的光路設計,便于使用者使用高數值孔徑物鏡得到高分辨率的相差圖像。根據所使用的物鏡,有四種類(lèi)型的相差環(huán)可供選擇(Ti-E/U/S通用)。
超高分辨率
使用尼康的高性能物鏡,包括60x和100xTIRF物鏡,具有世界zui高1.49的數值孔徑,并且整合球差校正環(huán),可以得到其它標準相差物鏡無(wú)法比擬的高分辨率相差圖像。
使用同款物鏡得到的"全亮度"熒光圖像由于沒(méi)有相差環(huán)導致的光線(xiàn)損失,在同一系統中,不僅可以進(jìn)行相差觀(guān)察,還可以得到更明亮的"全亮度"熒光圖像、共聚焦圖像和TIRF圖像。
用水浸物鏡來(lái)觀(guān)察相差圖像
通過(guò)外部相差單元,即使使用水浸物鏡也可以得到清晰、高分辨率的相差圖像。
用于圖像分析的高分辨率圖像
由于相差圖像與TIRF觀(guān)察、DIC觀(guān)察可以使用同樣的物鏡,得到的圖像可用于高性數據處理和圖像分析,例如TIRF圖像的細胞輪廓定義。
多端口分層結構支持研究
具有左端口、右端口和底*端口的多圖像端口設計可以在每個(gè)端口連接一個(gè)相機。另外分層結構的擴展空間設計可以加入一個(gè)后端口,這些特點(diǎn)方便用戶(hù)使用雙層熒光濾色塊盒和多相機進(jìn)行圖像獲取。 * Ti-E/B和Ti-U/B組合可選底端口
后端口確保多相機拍攝
使用可選的后端口設計擴展了圖像獲取能力。與側端口結合使用可以用兩個(gè)相機獲取雙通道圖像。例如當FRET (福斯特共振能量轉移)的熒光蛋白之間有觀(guān)察間隔、CFP和YFP的強度差別很大時(shí),可以通過(guò)調節單個(gè)相機的靈敏度來(lái)得到高信噪比圖像進(jìn)行比較。
分層結構提高可擴展性
Ti采用的分層結構充分利用了無(wú)限遠光學(xué)系統的優(yōu)勢,另外將PFS整合到物鏡轉換器??梢酝ㄟ^(guò)墊高塊在光路中引入PFS之外的兩個(gè)可選部件,利用該系統可以同時(shí)使用激光鑷、光活化單元和落射熒光裝置。每層的電動(dòng)熒光濾色塊盒可以單獨控制。
在更寬的波長(cháng)范圍內以更好的性能獲得多種熒光染料圖像
通過(guò)引入870nm的波長(cháng)阻擋裝置,研究者可以使用包括Cy5.5在內的近紅外熒光染料。從紫外到紅外范圍內的光學(xué)特性得到提升,可用的物鏡數目增加,在大范圍的應用中都可以實(shí)現焦點(diǎn)穩定,不管是在紫外范圍的Ca濃度測量還是紅外范圍的激光鑷。
非凡的快速圖像獲取
對96孔板進(jìn)行三通道(雙通道熒光和相差)快速拍攝,速度提高2倍以上。
尼康獨有的調焦系統(PFS)排除焦點(diǎn)漂移
焦點(diǎn)漂移是時(shí)間序列觀(guān)察中zui大的障礙。尼康的PFS系統對長(cháng)時(shí)間觀(guān)察過(guò)程中和加藥時(shí)可能出現的焦點(diǎn)漂移進(jìn)行校正。即使使用高倍物鏡或類(lèi)似TIRF這樣的技術(shù)時(shí)也可以維持焦點(diǎn)。另外,在物鏡轉換器上整合PFS有助于節約空間,并不限制Ti的可擴展分層結構。 PFS采用光學(xué)補償系統,對Z軸平面進(jìn)行實(shí)時(shí)校正。不需要使用PFS時(shí),也可以簡(jiǎn)單地將其撤出光路。
數字控制集線(xiàn)器顯著(zhù)提升了電動(dòng)附件的速度
尼康zui新研發(fā)的數字控制集線(xiàn)器通過(guò)減少部件之間的通訊時(shí)間,提高各附件的速度,進(jìn)而顯著(zhù)提高整體的操作速度。 PC控制對Ti的電動(dòng)部件進(jìn)行優(yōu)化,縮短從動(dòng)作命令到移動(dòng)之間的反應時(shí)間,從而對整體施行高速控制。 通過(guò)增加智能固件,電動(dòng)部件的整體操作時(shí)間顯著(zhù)縮短,例如三通道(雙通道熒光和相差)連續圖像獲取需要的總時(shí)間大大縮短,減少了對細胞的光毒性。
高速電動(dòng)控制與圖像獲取
同步控制若干電動(dòng)部件,諸如物鏡轉換器、熒光濾色塊、光閘、聚光器轉換器和載物臺,研究者可以進(jìn)行多維電動(dòng)實(shí)驗。更快的附件運動(dòng)和圖像獲取縮短整體的曝光時(shí)間,減少相應的光毒性,幫助研究者得到更有意義的數據。
提升每個(gè)電動(dòng)部件的速度
操作和/或轉換物鏡、濾光塊、XY載物臺、激發(fā)/阻擋濾光片的速度大幅增加,研究者可以專(zhuān)注于觀(guān)察和圖像獲取。新研發(fā)的控制器可以記錄和復制觀(guān)察條件,實(shí)現用鼠標控制載物臺,整臺顯微鏡就像研究者眼睛和手的延伸部分。
每種觀(guān)察方法均采用優(yōu)化的光學(xué)技術(shù),得到圖像
尼康優(yōu)化的光學(xué)技術(shù)提供多種模式觀(guān)察標本,向研究者呈現細胞的每一個(gè)細節。
Nomarski 微分干涉(DIC)
高對比度和高分辨率的平衡對于觀(guān)察細微結構至關(guān)重要。尼康獨有的DIC系統即使在低放大倍率下也可以得到高分辨率圖像。新型DIC滑塊(干)提供高分辨率和高對比度兩種選擇。濾光塊型DIC檢偏器可以置于電動(dòng)濾光塊盒內,將DIC觀(guān)察和熒光觀(guān)察的切換時(shí)間顯著(zhù)縮短。
相差
相差圖像觀(guān)察時(shí)可以使用CFI Plan Fluor ADH 100x (Oil)。該物鏡與傳統相差物鏡相比減少了相差圖像的光暈,增強了圖像的對比度。
暗場(chǎng)
使用高NA的聚光鏡可以進(jìn)行暗場(chǎng)觀(guān)察??梢詫ξ⒘W舆M(jìn)行長(cháng)時(shí)間的觀(guān)察,并避免光漂白。
霍夫曼調制相差(HMC)®
HMC物鏡與HMC聚光鏡部件組合可以得到類(lèi)似3D的高對比度、無(wú)光暈圖像,可以應用于培養在塑料培養皿中的透明樣本。
為T(mén)i系列研發(fā)的新型物鏡
CFI S Plan Fluor ELWD/ELWD相差物鏡
新研發(fā)的物鏡對近紫外(Ca2+)到近紅外波長(cháng)范圍內的光都有高通透性,并且改進(jìn)了色差校正。在多種照明模式下都可以得到高質(zhì)量無(wú)色差的圖像。
Plan Apochromat 20x物鏡
新型20x物鏡加入尼康專(zhuān)有的VC物鏡系列,該物鏡的軸向色差校正至405nm,是用于共聚焦觀(guān)察和光活化技術(shù)的理想物鏡。
提升可操作性
用于電動(dòng)操作的所有按鍵和控制轉換器設計都非常人性化,研究者可以不受到顯微鏡操作的影響,專(zhuān)注于研究。
操作按鍵位于顯微鏡主體的兩側和前面
熒光濾色塊的切換、物鏡轉換、Z軸粗/微調、PFS開(kāi)/關(guān)控制、透射照明開(kāi)/關(guān)控制都可以通過(guò)位于顯微鏡主體的按鍵進(jìn)行快速切換。
新研發(fā)的人機學(xué)控制器
通過(guò)手柄或人機學(xué)控制器可以控制高速電動(dòng)X(jué)Y載物臺和Z軸。
顯微鏡主體前面的VFD屏幕和操作按鍵
包括物鏡信息在內的顯微鏡狀態(tài)和PFS的開(kāi)/關(guān)狀態(tài)都會(huì )顯示在VFD屏上。調。
PFS補償功能
PFS的補償功能易于控制,只需一個(gè)按鍵就可以切換粗/微調。
遠程控制面板和預設按鍵
通過(guò)遠程控制面板可以操作顯微鏡,并確認顯微鏡目前的狀態(tài)。另外可以通過(guò)預設按鍵來(lái)自動(dòng)切換觀(guān)察條件。只需單單一個(gè)按鍵就可以完成從相差到熒光觀(guān)察的切換。
原創(chuàng )傾斜式設計
將顯微鏡主體的前部稍稍向后傾斜,操作者眼點(diǎn)與標本之間的距離縮短了約40mm,增強了可操作性。